Curva di taratura

È la premessa a qualsiasi metodica di laboratorio, perché ne permette l'interpretazione.

È la rappresentazione grafica della densità ottica in funzione della concentrazione della sostanza in esame.

Si costruisce effettuando una serie di misurazioni con concentrazioni note della sostanza e, conoscendo le corrispondenti densità ottiche, si ottiene, in un sistema di assi cartesiani, una retta, definita retta di interpolazione; questa è una risposta lineare. Qualora non fosse possibile ottenere una linearità della risposta, significa che la reazione chimica non segue la legge di Lambert-Beer; in questo caso occorre tracciare una curva di taratura, da preparare eseguendo un maggior numero di concentrazioni.

Una volta stabilite la retta o curva di interpolazione, è possibile misurare tutti i campioni con concentrazioni comprese tra i due limiti, mediante il metodo grafico, ovvero tracciando rette perpendicolari, e mediante il metodo algebrico.

Cc : Cst = DOc : Dost

Cc = (Cst x DOc) / DOst

Dove:

Cc: concentrazione del campione.

Cst: concentrazione standard.

DOc: densità del campione.

DOst: densità standard.

Se la densità ottica del campione in esame cade al di fuori dei limiti, si possono operare concentrazioni o diluizioni; in tal caso, però, il risultato dovrà essere per quanto è stato concentrato, o moltiplicato per quanto è stato diviso.

La curva di taratura definisce, pertanto, i limiti di utilizzazione, ovvero il range di valori a noi più utili; per esempio le proteine sieriche, in concentrazione media di 7 grammi/100 ml, avrà un range da 1 a 10 grammi/100 ml, corrispondente ai valori minimi e massimi compatibili con la vita.

È chiaro, inoltre, che il range di concentrazione deve essere quanto più ristretto possibile per minimizzare al massimo il margine d'errore.